Trizol/總RNA提取試劑
1. 推薦操作步驟 :
1) 取50-100mg組織加入lml總RNA提取試劑勻漿,冰浴5min。如果從細(xì)胞中提取,直接在5×106 或 1× 107 的細(xì)胞中加入 lml總RNA提取試劑充分混勻使細(xì)胞裂解,冰浴 5min;
2) 將樣品轉(zhuǎn)移到 1.5ml離心管中(所用物品均應(yīng)無RNAse酶),每毫升RNA提取液加入 0.4ml氯仿,充分混勻,冰浴放置 5min;
3) 18000 g 4℃離心, 15min;
4) 將上層水相轉(zhuǎn)移到另一干凈 l.5ml離心管中,加等體積,混勻置于零下20℃冰箱培養(yǎng)10min;
5) 18000 g 4℃離心, 15min;
6) 棄上清,加入l.5ml 70%冷洗滌冰浴5min(所用物品及試劑均應(yīng)無RNAse酶污染),12000 g 4℃ 離心5min;
7) 棄上清,干燥RNA,加適量無RNase水(1mM EDTA 溶于0,1%DEPC水)溶解RNA。(切記RNA不能完全干燥,否則不易溶解)。
2.包裝:100ml/500ml
3.保存條件:-70℃
4.有效期: 一年